Reinado | Bacterias |
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Rama | Proteobacterias |
Clase | Proteobacterias gamma |
Pedido | Legionellales |
Familia | Legionellaceae |
Las bacterias del género Legionella , la Legionella , son bacilos Gram negativos .
Se trata de bacterias presentes de forma natural en el agua y los lodos , responsables de una enfermedad respiratoria , la legionelosis . Con frecuencia colonizan las redes de agua, en particular las redes de agua caliente sanitaria , los sistemas de aire acondicionado y las torres de refrigeración de aire (TAR).
Legionella se desarrolla y prolifera:
Legionella se multiplica débilmente por debajo de 20 ° C , deja de reproducirse a 55 ° C y se destruye a partir de 60 ° C (según un tiempo de contacto muy preciso) para destrucción instantánea de 70 - 74 ° C .
La presencia de Legionella en el agua no es condición suficiente para causar la enfermedad. Deben estar presentes tres factores:
No se ha diagnosticado ningún caso de legionelosis tras la ingestión de agua contaminada, ni ha habido ningún caso de transmisión de persona a persona. La cantidad de inóculo bacteriano no parece influir en el desarrollo de legionelosis. Finalmente, se incriminaron factores climáticos (lluvias intensas y humedad, rebrote de casos en verano).
Además, los factores de susceptibilidad relacionados con el huésped humano son necesarios para el desarrollo de la enfermedad, aunque no se comprenden completamente en la actualidad. Sin embargo, los factores de riesgo se pueden individualizar: edad avanzada, déficit de inmunidad (cáncer / enfermedad de la sangre, diabetes) pero sobre todo tabaquismo. La infección se describe excepcionalmente en niños.
El umbral límite que no debe superarse es 1000 UFC / litro de Legionella pneumophila para agua caliente sanitaria (ACS) y para torres de enfriamiento de aire (TAR), nueva norma AFNOR NF T90-431 de noviembre de 2014, revisada en agosto de 2017 . Para ART, se establecen 3 umbrales: <1000 UFC / l ; entre 1.000 y 100.000 UFC / ly > 100.000 UFC / l . Los 2 últimos umbrales requieren acciones curativas por parte del operador. Finalmente, los resultados se pueden representar en forma de Flora interferente.
Se estima, en Europa, que el 90% de las legionelosis están relacionadas con la especie L. pneumophila y que, en promedio, el 85% se debe exclusivamente al serogrupo 1. Los serogrupos 2 a 15 comparten el 10% restante. Por el contrario, en Australia, es la especie longbeachae la responsable de la mayoría de los casos de legionelosis. Finalmente, hay otras 51 especies en el género Legionella que comúnmente se llama Legionella spp y cuyo riesgo infeccioso es discutido por higienistas y especialistas en enfermedades infecciosas. Sin embargo, la presencia de Legionella spp demuestra que las condiciones de la red son óptimas para la multiplicación de Legionella y, por tanto, potencialmente de Legionella pneumophila .
Hay alrededor de 6.000 casos por año en Europa y entre 1.200 casos y 1.600 casos por año en Francia, con una tasa de mortalidad que oscila entre el 10 y el 15% a pesar del tratamiento antibiótico apropiado (143 muertes por 1.262 casos reportados en 2013 y se conoce la evolución de los cuales sólo para 1.168 casos , es decir, una letalidad del 12,2%) (fluoroquinolonas o macrólidos).
Las Legionella son de origen hidro-telúrico. Su hábitat natural está representado por ambientes acuáticos naturales o artificiales. Allí reside, entre otras cosas, en las biopelículas (residuos orgánicos y microorgánicos formados en las tuberías y en la superficie del agua estancada) que la protegen de la cloración y parecen jugar un papel importante para su supervivencia en las instalaciones. También se encuentra en biopelículas de sistemas de agua domésticos, a veces asociadas con Pseudomonas aeruginosa . Además de la naturaleza del agua (acidez, mineralización, materia orgánica y contenido de nutrientes), la temperatura y el tipo de materiales utilizados en la plomería también juegan un papel importante en la formación de biopelículas.
La biopelícula se desarrolla particularmente en:
Además, los protozoos de agua dulce (incluida la ameba ) representan el huésped natural de legionella dentro del cual realiza una etapa de su ciclo de vida. La bacteria y su huésped han experimentado evolución convergente que permite a las bacterias adquiridas en su herencia genética de los genes que codifican la mayoría de los factores de virulencia de la legionella. El comportamiento y la virulencia de Legionella en su entorno microbiano aún es poco conocido (por ejemplo, el de su capacidad para invadir ciertos protozoos), y las amebas, así como su propio entorno: ecosistema de biopelículas en particular, interacciones con otras especies, turbulencia del agua. en redes, etc. La ANSES dijo en 2011 que "se descuida demasiado el seguimiento de los protozoos (amebas y ciliados) en las instalaciones y su contribución a la peligrosidad de las instalaciones en riesgo" .
La legionelosis puede manifestarse en dos formas clínicas distintas:
La infección nosocomial está implicada en 1 a 10% de los casos de neumonía nosocomial.
Legionella pneumophila puede infectar amebas acuáticas, así como macrófagos alveolares y neumocitos de humanos siguiendo un ciclo infeccioso similar.
Al entrar en contacto con su célula huésped (ameba o macrófagos), L. pneumophila utiliza su principal factor de virulencia: su sistema de secreción tipo IV Dot / Icm. Este sistema permitirá que las bacterias inyecten directamente en el citoplasma de su huésped más de 300 proteínas bacterianas llamadas efectoras. Estas proteínas permitirán a la bacteria desviar la maquinaria celular de su huésped en su beneficio.
Algunos de estos efectores están implicados en los mecanismos de entrada a la célula huésped mediante el secuestro de los procesos de macropinocitosis o fagocitosis. Estas proteínas bacterianas también son necesarias para que las bacterias escapen de la degradación por la ruta endosomal del huésped, en particular el efector SidK. También participan en la creación de una vacuola de replicación para la bacteria, denominada LCV para la vacuola que contiene Legionella, que se caracteriza en particular por el reclutamiento de vesículas que se originan en el retículo endoplásmico. Muchos efectores del sistema Dot / Icm están involucrados en este proceso: SidM / DrrA, SidC, RalF, LepB, etc. Así camuflada en el LCV, la legionella podrá multiplicarse exponencialmente hasta agotar todos los recursos nutricionales disponibles. Esta deficiencia desencadena entonces una reprogramación de la expresión genética de la bacteria que luego expresa sus factores de virulencia (efectores del sistema de secreción tipo IV en particular) y los factores de movilidad (flagelo). Luego, las bacterias se liberan en el citoplasma del huésped y luego en el entorno en el que tendrán que sobrevivir, a veces en forma de biopelículas, hasta que se infecte una nueva célula huésped.
Para redes de ACS:
Existen diferentes métodos que el Ministerio de Salud ha probado y validado para las redes de agua potable. Estos métodos aparecen en la circular 2002/243 deAbril de 2002. Encontramos en particular:
El choque con peróxido de hidrógeno y plata (H 2 O 2+ Ag) que consiste en hacer circular la solución por toda la red y puntos contaminados (cuando no esté en uso) a una concentración que va de 100 a 1000 mg / L de peróxido de hidrógeno + ag por un tiempo de contacto de hasta 'a las 12 horas . Al final del tiempo de contacto, se realiza un vaciado completo de la red. Una de las ventajas de este método es destruir la biopelícula.
El choque de cloro consiste en obtener una concentración de cloro libre de 15 mg / l durante 24 ho de 30 a 50 mg / l durante 2 a 3 horas a nivel de reservorios. Se realiza un vaciado completo de la red después de haber pasado el agua clorada por el máximo o incluso por todos los puntos de uso.
El choque térmico se lleva a cabo elevando la temperatura del agua a 70 ° C durante 30 minutos y el agua debe fluir a todos los puntos de uso durante 5 a 10 minutos o más a 65 ° C .
Riesgos asociados con los choques:
Para las TAR (torre de enfriamiento o torre de enfriamiento de aire) , la ley de salud pública de 2004 tenía como objetivo reducir el número de casos de legionela en un 50% para el período 2004-2008. Los decretos de 2004 han evolucionado a través de los de14 de diciembre de 2013.
Para las redes de ACS (agua caliente sanitaria) , es necesario basarse en las órdenes del1 st de febrero de 2010(control y prevención de la contaminación de las redes de agua caliente sanitaria por legionella. Parecería lógico seguir las amebas (que son a priori indicador y factor de riesgo), pero puede haber legionella sin amebas, y el método común de detección de amebas es caro, requiere mucho tiempo y no todos los laboratorios están equipados para ofrecerlo, por lo que no se utiliza de forma rutinaria, pero es útil en caso de sobrecontaminación posterior al tratamiento.
Por tanto, el seguimiento está avanzando en Francia, donde se ha vuelto obligatorio para el agua mineral para uso terapéutico (en establecimientos termales), en torres de enfriamiento de aire, en cualquier red de agua caliente sanitaria de un establecimiento de salud o establecimientos sociales y médicos. residencias turísticas, campings, establecimientos penitenciarios y finalmente todos los edificios públicos con duchas colectivas de producción de ACS.
A1 st de enero de 2012, esta obligación se extiende a otros establecimientos abiertos al público (ERP).
La DGS y la DGPR reconocieron en 2009 que el método de cultivo (obligatorio en Francia) impone un retraso después del cultivo (son necesarios al menos 8 días de cultivo, aunque son posibles resultados intermedios y obligatorios en caso de sobrepasar entre 3 y 5 días), lo que va en detrimento de la mejor gestión de las instalaciones y de la optimización de los plazos para el levantamiento de las medidas restrictivas de uso del agua. Además, no tiene en cuenta todas las formas de Legionella, porque hay una serie de Legionella y otras bacterias viables presentes en el agua, pero que no sabemos cómo cultivar.
Una opinión y un informe (2011) de la experiencia colectiva de ANSES evaluaron los métodos para detectar y contar legionella en el agua , concluyendo que solo dos métodos son "suficientemente relevantes y robustos" ; el método de cultivo regulatorio (estándar NF T90 431) y (más rápido pero no regulatorio en los decretos ECS y TAR) PCR cuantitativa (estándar NF T90 471).
En la actualidad, no existe ningún sistema portátil capaz de realizar el recuento de Legionella.
Es obligatorio en las redes ACS y TAR a través de los Cuadernos Sanitarios ECS o TAR:
El control bacteriológico es obligatorio (en un entorno hospitalario a menudo realizado por un técnico biohigienista ):
Aparte de las muestras microbiológicas:
En los establecimientos de salud, los procedimientos relativos a la red de agua deben ser validados por el CLIN del establecimiento. En caso de alerta, se debe notificar a la gerencia y al CLIN.
En caso de intervención técnica en la red de agua, el personal debe estar protegido de cualquier aerosol de agua, en particular cuando se trabaja en la red de agua caliente. Uso de máscara FFP3.
Los guantes son innecesarios para la protección contra Legionella. La legionelosis es una infección estrictamente respiratoria, no existen infecciones cutáneas por Legionella .
Las bacterias del género Legionella son bacilos gramnegativos (pero rara vez visibles en el examen directo), son móviles (1 o 2 flagelos polares), aeróbicos estrictos , catalasa débilmente positiva. Su pared tiene la particularidad de contener ácidos grasos insaturados ramificados. Estas bacterias son particularmente exigentes y solo pueden cultivarse en medios especiales que contengan cisteína y hierro, como el medio CYE ( carbón vegetal , extracto de levadura ), el medio GVPC o el medio BCYE ( extracto de levadura de carbón tamponado con cisteína, hierro y carbón vegetal). medio negro para evitar que los radicales libres maten la legionella in vitro .
Es un medio de cultivo utilizado para el aislamiento selectivo de Legionella; también se llama agar Legionella