Una prueba de VIH (para anglicismo , a veces se llama prueba de VIH ) está diseñada para detectar la presencia en el cuerpo humano del VIH (VIH) responsable del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA).
Existen varios tipos de pruebas de VIH (como ELISA y Western blot que son técnicas de prueba no específicas del VIH), las principales utilizan la detección de anticuerpos y / o antígenos (proteínas) y / o de una secuencia. De ARN de VIH . Debido a las limitaciones inherentes a cualquier prueba biológica, es necesario realizar varias pruebas (sucesivamente una prueba sensible y luego una específica) antes de que el paciente sea declarado seropositivo para el VIH.
Las pruebas de VIH se realizan por una variedad de razones, como cuando se sospecha una infección o para la prevención cuando se trabaja en un entorno de riesgo, como un hospital . Para combatir la transmisión de personas que desconocen su estado serológico, los países han introducido posibilidades de pruebas gratuitas y anónimas.
Se ofrecen algunas pruebas “rápidas” con fines de diagnóstico: estas son las TROD . Todas las pruebas deben complementarse con una segunda prueba realizada en un análisis de sangre 2 e para descartar falsos negativos y falsos positivos.
Las pruebas de anticuerpos de bajo costo y alta precisión están diseñadas especialmente para las pruebas de rutina del VIH en adultos. Si una persona no tiene un riesgo razonable de infectarse, estas pruebas no son necesarias.
Las pruebas de anticuerpos dan resultados falsos negativos ( error de la especie 2 ) durante el período de ventana , que dura de tres a seis semanas, desde el momento de la infección por el VIH hasta que el sistema inmunológico comienza a producir una cantidad detectable de anticuerpos . Esto significa que las pruebas de anticuerpos son ineficaces durante este período. En la gran mayoría de las personas, los anticuerpos detectables aparecen después de tres semanas. Un período de ventana de seis semanas es extremadamente raro, gracias a las pruebas de anticuerpos más recientes. Aunque el VIH permanece indetectable durante este período de ventana, una persona infectada puede muy bien transmitir el virus. Los medicamentos antirretrovirales administrados durante este período de ventana pueden ralentizar la formación de anticuerpos y alargar el período de ventana más allá de las doce semanas.
Según un informe HAS detallado del mes deOctubre de 2008, un resultado negativo de la prueba de detección combinada ELISA 6 semanas después de la presunta exposición puede considerarse un signo de ausencia de infección por el VIH. En caso de tratamiento profiláctico posterior a la exposición, se aplica el período de 3 meses después de suspender el tratamiento.
Co-infección con hepatitis viralEn caso de contaminación simultánea con el VIH y un virus de la hepatitis (A, B o C ), por ejemplo con la sangre de un paciente en un entorno hospitalario o al intercambiar jeringas con un drogadicto doblemente infectado, los resultados de las pruebas seguirán siendo fiables a las 6 semanas y alcanzar el 99,8% de fiabilidad a las 4 semanas desde la última toma de riesgo.
La mayoría de estas pruebas biológicas se llevan a cabo como parte de la detección del virus del SIDA (VIH). Otros se encuentran en el contexto de la monitorización infecciosa.
Esta sección describe el uso de las diferentes pruebas, su descripción detallada se da en la siguiente sección Técnicas . El acrónimo ° se refiere a su descripción en esta sección.El diagnóstico serológico es un procedimiento médico realizado en Francia por un médico.
El diagnóstico para determinar el estado serológico se realiza en dos etapas:
El primer paso se basa en la detección de anticuerpos producidos en respuesta a una infección por VIH, estos son los anticuerpos anti-VIH. Esta producción de anticuerpos se puede detectar con los medios actuales en promedio 22 días después de la contaminación. Durante este período, llamado período ventana, el paciente es perfectamente infeccioso, lo que plantea evidentes problemas de salud pública . Una vez que ha pasado el período de ventana, se puede establecer su estado serológico.
El cribado utiliza el método ELISA ° , que utiliza la reacción anticuerpo-antígeno para detectar la presencia de anticuerpos anti-VIH. Para evitar falsos negativos y así no perder un caso de seropositividad, la prueba debe tener una sensibilidad óptima, luego se utiliza una mezcla de antígenos virales que permitan la detección de anticuerpos anti-VIH-1 y anti-VIH. VIH-2 ( esto se llama ELISA mixto). En el contexto de las donaciones de sangre, con el objetivo de eliminar cualquier bolsa infectada, una prueba es suficiente (valor predictivo negativo óptimo). En el contexto de un diagnóstico médico para un paciente, en Francia, se realizan al menos dos pruebas de marca y fabricación diferentes del tipo ELISA sobre la misma muestra de sangre y posiblemente tres en función del riesgo de exposición del paciente evaluado por el médico. De hecho, cuando la prevalencia de seropositividad en una población es baja, la probabilidad de que una prueba positiva sea un falso positivo aumenta, en aplicación del teorema de Bayes . En todos los casos se debe realizar una prueba confirmatoria diferente pero el uso de una prueba doble permite evitar falsos positivos aumentando el valor predictivo positivo desde el primer paso.
Cuando solo una de las pruebas da positivo, las pruebas son contradictorias y el médico puede decidir repetir las pruebas en una nueva muestra de sangre o realizar una prueba confirmatoria directamente. Las pruebas también pueden resultar indeterminadas, en este caso es recomendable esperar unas semanas o un mes antes de proceder a nuevas pruebas. En el último caso, si las pruebas no son simplemente incorrectas, pueden revelar un estado de seroconversión.
Las pruebas de detección son positivas después de un retraso de varias semanas o meses, que varía de persona a persona. Este período, que se estima en un máximo de 3 meses, precede a la seroconversión y se denomina ventana serológica: durante esta fase, el sujeto es infeccioso pero sus pruebas serológicas son negativas. Los laboratorios consideran que las pruebas son fiables en un 99,8% tan pronto como cuatro semanas después del riesgo. Las llamadas pruebas mixtas combinadas de 4ª generación, ahora ampliamente aunque no sistemáticas, son totalmente fiables a partir de las 6 semanas posteriores al riesgo. Estas pruebas combinan la prueba ELISA con la detección de alto rendimiento de la antigenemia p24, lo que permite un cribado un poco antes que la prueba ELISA realizada sola. El período de 3 meses sigue siendo válido para otras pruebas (pruebas más antiguas y pruebas de detección rápida). Además, las pruebas de detección pueden dar falsos positivos en determinados casos: después de una vacuna antigripal, para personas con lupus ( enfermedad autoinmune ).
Prueba de confirmaciónLas pruebas de detección, cuando son positivas, deben ser confirmadas por una llamada prueba de confirmación (en la práctica, Western blot ° ). Las pruebas de cribado se eligen por su sensibilidad con el fin de evitar todos los casos falsos negativos y pueden reaccionar en casos raros a anticuerpos inespecíficos, por lo que es necesario realizar una prueba con buena especificidad que tenga como objetivo saber si los anticuerpos detectados están vinculados a la infección por VIH-1. El western blot se utiliza generalmente el método (WB). El método específico requiere que los antígenos virales estén separados y deben detectar al menos dos de las tres glicoproteínas virales (gp160, gp120 o gp41) o la proteína p24 y la glicoproteína gp160 (que indica el inicio de la seroconversión). Nuevamente, si la prueba es dudosa o indica el inicio de la seroconversión, se realiza una segunda prueba de confirmación tres semanas después, mientras se espera que se complete la seroconversión. Tras esta prueba surgen tres casos:
Es solo después de todas estas pruebas que un médico puede declarar a un paciente VIH positivo.
Pruebas realizadas en niños nacidos de madres seropositivasEl aislamiento en cultivo ° se utiliza generalmente para los recién nacidos de madres VIH positivas porque son hechos VIH positivos (sin estar necesariamente infectados por el VIH): los anticuerpos de la madre se han transmitido. La infección se confirma cuando se detecta actividad de transcriptasa inversa o se detectan antígenos p24. También se practica la detección de ARN viral, buscamos los genes gag o pol del VIH. Este método tiende a reemplazar el método de aislamiento por cultivo para recién nacidos.
En Francia :
En canadá :
En Haití :
La fiabilidad depende del correcto avance de todos los pasos, lo que permite, tras un cribado completo (prueba y contraprueba) obtener una fiabilidad cercana al 100%, fuera de la ventana serológica; este no es necesariamente el caso de las pruebas rápidas. Si la probabilidad de un falso positivo es casi nula, la posibilidad de que una prueba negativa sea errónea depende principalmente del período de ventana. Puede ser necesario realizar pruebas periódicas.
Los análisis de sangre para ELISA de VIH se utilizan con mayor frecuencia en la detección - detección en inglés. Estas pruebas se eligen por su alta sensibilidad . En la práctica, esto evita perderse un caso infectado al declararlo falsamente saludable, un caso falso negativo . Por tanto, una prueba ELISA es suficiente en la detección de bolsas de sangre en el contexto de una transfusión (donaciones de sangre). Para un diagnóstico serológico de un paciente, esta prueba debe ser confirmada por una prueba confirmatoria, no estando libre de falsos positivos . Sin embargo, tras la generalización del cribado, especialmente en Europa (cribado anónimo y gratuito en Francia ), se observó que algunos pacientes se negaron a acudir a recoger los resultados de estas pruebas confirmatorias, prefiriendo dejar en duda su estado serológico; en la actualidad se realizan normalmente dos pruebas de tipo ELISA, reduciéndose entonces considerablemente el caso de falsos positivos . En todos los casos, siempre se realizan pruebas adicionales.
Principio: en el caso de la investigación de antígenos, se usa un anticuerpo primario que lo reconoce, luego se usa un anticuerpo secundario, que reconoce al anticuerpo primario. El anticuerpo secundario se acopla a una enzima que reaccionará con su sustrato, esto produce una coloración medida por la densidad óptica. Nota: como varios anticuerpos secundarios se unen al anticuerpo primario al mismo tiempo, la señal se amplifica.
Se denomina carga viral a la cuantificación del ARN del VIH en plasma , producido por RT-PCR . Esto se expresa en número de copias / ml y en log (base 10). Como en cualquier sistema de cuantificación biológica, existe un umbral por debajo del cual la RT-PCR no puede cuantificar el virus, por lo que se dice que la carga viral es indetectable . Este umbral es de 50 copias / ml (posiblemente 40 o 20 copias / ml para algunas pruebas recientes). Por debajo de este umbral, la indetectabilidad no significa que el virus no esté presente en el cuerpo - y que este último no esté infectado -: puede estar presente en pequeñas cantidades. Hoy en Francia, varios laboratorios permiten cuantificar hasta 20 copias / ml, a continuación los laboratorios no pueden cuantificar con precisión, sin embargo, si los laboratorios no pueden cuantificar las 1 o 5 copias con precisión, algunos laboratorios como los laboratorios de Roche utilizan el Cobas 8800 La RT-PCR en tiempo real, por ejemplo, permite cuantificar la copia 0. En este caso, los resultados del análisis indicarán: 0 copia o ausencia de detección de ARN. Hoy en día, con tratamientos anti-VIH cada vez más potentes, cada vez más personas VIH positivas en tratamiento llegan a 0 copias de ARN en la sangre, esto no significa una cura, porque el VIH permanece presente en los reservorios sanguíneos, pero sin embargo esto confirma que los tratamientos son más violentos frente al VIH y esto quizás podría confirmar una cura funcional a largo plazo y más fácil de lograr.
La cuantificación del ARN plasmático del VIH es, junto con la cuantificación de linfocitos T4 o CD4 , el examen principal del seguimiento infeccioso del paciente.
Además, en la progresión normal del VIH observada en la mayoría de los pacientes, la carga viral aumenta tan pronto como ocurre la infección antes de regresar. Una carga viral es generalmente detectable 15 días después de la contaminación y durante el período de ventana. Esta prueba puede formar parte del diagnóstico y puede realizarse en algunos casos para la detección precoz de seropositividad. Si bien un valor positivo es concluyente, una carga viral indetectable no lo es.
A diferencia de la cuantificación del ARN plasmático y, por tanto, de los virus que circulan en la sangre, la cuantificación del ADN del VIH permite buscar el genoma viral o pro-viral integrado en forma de ADN en las células infectadas. No debe confundirse con la cuantificación del ARN , la cuantificación del ADN del VIH no es una parte rutinaria del seguimiento médico y hoy en día no permite ninguna interpretación particular del estado del paciente. La investigación sobre el ADN del VIH se utiliza hoy en día en la investigación para diagnosticar a los bebés nacidos de madres infectadas en una etapa temprana.