Las bacterias en Gram-negativas se destacan por una coloración técnica llamada tinción de Gram . Las bacterias gramnegativas luego aparecen rosadas bajo el microscopio . La técnica de tinción se basa en las características de la membrana y la pared de las bacterias. Sin embargo, este no es un factor de clasificación filogenético : de hecho, los grupos Gram + y Gram - no son monofiléticos .
Después de fijar las bacterias en un portaobjetos (dos métodos posibles: fijar con etanol a 90 ° (5 minutos) o pasar el portaobjetos a través de la llama, llamado frotis ):
Luego se recupera el portaobjetos, se enjuaga y se seca, luego se observa bajo un microscopio óptico, generalmente con un objetivo x100 + aceite de inmersión. Las bacterias Gram negativas aparecerán en rosa. La observación de su color suele ir acompañada de descripciones estructurales (por ejemplo, bacilo o concha ).
Las bacterias gramnegativas tienen (con algunas excepciones) una estructura de bimembrana que se organiza en tres grandes partes, a saber, desde el exterior hacia el interior:
La membrana externa está en contacto directo con el entorno externo. Está compuesto principalmente por fosfolípidos organizados en una bicapa (parte hidrofílica en el exterior y parte lipofílica en el interior) pero también contiene muchas proteínas intrínsecas , en particular proteínas de transporte llamadas porinas . Muchas bacterias Gram negativas (por ejemplo, Salmonella ) también tienen un compuesto no proteico llamado lipopolisacárido o LPS; este compuesto poco inmunogénico , cuya patogenicidad (lípido A) está incluido en la membrana externa, se activa durante la lisis de las bacterias. La membrana externa está conectada al peptidoglicano a través de la lipoproteína de Braun .
El espacio periplásmico es un espacio de almacenamiento de enzimas , nutrientes, etc. Tiene muchas otras funciones, particularmente en ciertas etapas de la biosíntesis de proteínas y en el metabolismo . Se encuentra entre la membrana externa y la membrana plasmática y contiene una capa de peptidoglicanos. La capa de peptidoglicano (también llamada mureína) es relativamente delgada en Gram negativos a diferencia de Gram positivos .
La membrana plasmática es similar a la membrana externa (excepto LPS). Tiene proteínas porosas que terminan en el espacio periplásmico (biosíntesis de proteínas). La membrana plasmática contiene muchos otros complejos de proteínas de vital importancia para las bacterias (como la ATP sintasa ) que tienen funciones importantes en el metabolismo bacteriano.
Sin embargo, cabe señalar que se cuestiona el propio hecho de agrupar las bacterias en estas familias, con la excepción de la familia de las Enterobacteriaceae que, por sí solas, tienen un parecido genético entre sí y no solo bioquímicamente.