La redistribución de la fluorescencia después del fotoblanqueo (en inglés : fluorescence recovery after-photobleaching , FRAP ) es un método utilizado en microscopía de fluorescencia para medir la velocidad de difusión molecular. Se puede aplicar para estudiar la movilidad molecular en células vivas .
Cuando tenemos una distribución homogénea de una población molecular fluorescente , podemos inhibir irreversiblemente su fluorescencia en un área restringida de la muestra mediante fotoblanqueo mediante un destello de luz obtenido exponiendo muy brevemente esta área con un láser . Por lo tanto, creamos dos poblaciones de moléculas (una fluorescente y la otra no) espacialmente distintas. Si las moléculas son capaces de moverse en el medio, se produce una redistribución de las dos poblaciones entre la zona blanqueada y el medio adyacente hasta que las poblaciones se homogeneizan: la zona blanqueada - o blanqueada - se vuelve gradualmente fluorescente nuevamente. El análisis de la cinética de recuperación de la fluorescencia permite deducir el coeficiente de difusión lateral “D”, característico de la velocidad de movimiento de las moléculas en el medio (cuanto mayor es la velocidad de difusión, más rápido vuelve a aumentar la fluorescencia).
El FLIP ( pérdida de fluorescencia inducida por fotoblanqueo ) es otra forma de estudiar la movilidad molecular. En este caso, se realiza un blanqueo repetitivo en una zona o en un punto, hasta que la fluorescencia haya desaparecido por completo o ya no varíe. FLIP permite resaltar continuidades en estructuras celulares.
Estos dos métodos se llevan a cabo generalmente por microscopía confocal o por microscopía de fluorescencia por excitación multifotónica .
FRAP también se traduce a veces como "Recuperación de fluorescencia después del fotoblanqueo" o "Recuperación de fluorescencia después del fotoblanqueo".