El medio Löwenstein Jensen (LJ) es un medio de cultivo semidefinido sólido débilmente selectivo utilizado en microbiología para el cultivo de Mycobacteria , incluyendo patógenos "complejos Mycobacterium tuberculosis ". Fue desarrollado en 1932 por KA Jensen sobre la base de una fórmula propuesta el año anterior por E. Loewenstein. Debido a la rentabilidad satisfactoria y la preparación relativamente fácil a partir de ingredientes comunes, se ha establecido gradualmente como el medio sólido estándar para el diagnóstico microbiológico de la tuberculosis . En 1998 fue el primer medio recomendado por la OMS para el aislamiento de micobacterias a partir de muestras respiratorias.
Al igual que otros medios a base de huevo, el medio LJ se ve cada vez más desafiado por el rendimiento superior de los medios líquidos y los sistemas de detección de crecimiento automatizados, cuyas contribuciones de diagnóstico son significativas en términos de sensibilidad y especialmente de velocidad. Sin embargo, la difusión de estas técnicas en los países en desarrollo , donde se concentran las áreas endémicas de tuberculosis, está limitada por su costo y por un mayor riesgo de contaminación de los cultivos (medios menos selectivos) y del personal de laboratorio (producción de aerosoles durante la manipulación).
La base nutricional es rica. Al igual que el medio Ogawa , es un medio de huevo, los importantes requisitos nutricionales de las micobacterias están cubiertos por las sustancias (lípidos, proteínas, vitaminas, etc.) contenidas en la clara y la yema de un huevo de gallina. La L-asparagina es una fuente de nitrógeno de aminoácidos. El glicerol completa estas aportaciones salvo determinadas micobacterias (incluida M. bovis ) sobre las que ejerce un efecto inhibidor. El citrato y el magnesio son factores de crecimiento.
El almidón incorporado inicialmente en forma de almidón de patata a veces se omite porque no se ha demostrado su función nutricional.
El verde de malaquita es un tinte de estructura de triarilmetano que se utiliza como inhibidor bacteriano de amplio espectro. El dihidrogenofosfato de potasio se utiliza como tampón .
Para 1600 ml de medio (fórmula original que contiene almidón):
Algunos proveedores ofrecen la versión sin almidón.
Los ingredientes termoestables se disuelven en agua destilada caliente y la mezcla se esteriliza en un autoclave (15 minutos a 121 ° C). Los huevos se desinfectan con mucho cuidado en la superficie y luego, trabajando en condiciones asépticas, se abren y homogeneizan. El volumen requerido de la emulsión de yema y clara de huevo se mide utilizando un tubo de ensayo estéril y luego se mezcla con la solución anterior. El verde de malaquita se introduce asépticamente, por ejemplo mediante filtración esterilizante. La mezcla se homogeneiza suavemente para evitar la introducción de burbujas de aire.
El medio se distribuye en recipientes estériles (tubos o matraces) con tapones de rosca inclinados para formar una pendiente que se extiende a lo largo de toda la altura del recipiente. Se dejan coagular en esta posición durante 45 minutos a 85 ° C. Para detectar cualquier contaminación durante la preparación, se recomienda realizar un control de calidad sistemático incubando el medio a 37 ° C durante 24 horas. Después de esta comprobación se conservan en nevera (2 - 6 ° C) con el tapón cerrado durante un período máximo de algunas semanas.
Se han desarrollado varias variantes del medio LJ para aumentar su selectividad o mejorar el crecimiento de ciertas micobacterias: