La tinción de tejido biológico es a menudo necesaria para la identificación. Algunas tinciones son compatibles con la vida celular, otras requieren fijación de tejidos y, a veces, la creación de cortes histológicos .
Para permitir la observación de orgánulos por microscopía óptica , se utilizan sustancias colorantes .
Un tinte es una solución acuosa que puede cargarse eléctricamente y que puede colorear una sustancia o un conjunto de sustancias de forma estable.
Compuesto por un grupo cromóforo (color) y un grupo auxocromo (grupo ionizado): fijación permanente en grupos ácidos o básicos de constituyentes celulares (a un pH determinado)
Caracteristicas:
Las sustancias ácidas (cargadas -) en la célula se tiñen con un tinte básico (cargado +), las sustancias básicas (cargadas +) en la célula con un tinte ácido (cargado -).
Esta coloración colorea un tipo de relleno. Podemos ver la morfología de la célula (forma), la posición del núcleo y su forma. Por lo tanto, podemos determinar el número de tipos de células en el tejido y la estructura de este tejido (células unidas o no).
Las reacciones redox que actúan sobre macromoléculas proporcionan información sobre la constitución química de la célula. Ejemplos:
Los tintes ácidos tienen una buena afinidad con las sustancias alcalinas, revelan tejidos básicos y, por tanto, acidófilos .
Revelan tejidos ácidos, conocidos como basófilos .
Muchos colorantes utilizan dos tintes: yodo verde carmino-verde o verde carmín (técnica de doble coloración en rosa y verde), eosina - azul de metileno ...
Algunas telas fijan la plata. Hablamos de estructuras argentafinas o estructuras argirofílicas .
Esto resalta los tejidos cromafines , como la médula suprarrenal.
Se han desarrollado varios métodos de tinción para revelar ciertas estructuras. A continuación, se enumeran algunos en una tabla:
Colorante | Componentes | Citoplasma | Colágeno | Elastina | ADN | Otro | pH |
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Hematoxilina y eosina | Hematoxilina y eosina | Rosa rojo | Rosa rojo | Rojo | azul oscuro | ? | |
van Gieson | Hematoxilina , ácido fucsina y ácido pícrico | amarillo | Rojo | - (a veces rosa) | negro | ? | |
Goldner | Hematoxilina , fucsina ácida , verde claro SF | Rojo | verde | - | negro | ? | |
Elastica | Resorcinol , fucsina | púrpura-marrón | |||||
Azan | Azocarmina , azul de anilina | Rojo | azul | - (a veces rosa) | Rojo | ||
Ladewig | Naranja G , azul de metileno , fucsina ácida , hematoxilina | rojo ( eritrocito naranja) | azul | negro | |||
Sudán III | Tinte soluble en lípidos | Grasa en naranja | |||||
NO | Hematoxilina , ácido periódico , reactivo de Schiff | azul | Polisacáridos : rojo púrpura | ||||
Nissl | Tionina (o toluidina o violeta de cresilo ) | azul (con RE ) | azul | ||||
Tinción de May-Grünwald Giemsa | Eosina , azul de metileno y azur de metileno | rojo en los glóbulos rojos , azul en los linfocitos | azul |
Aunque no son tinciones directamente histológicas, estos métodos tienen como objetivo distinguir entre varios tipos de células. También utilizan los mismos tipos de tintes:
Para permitir la observación de orgánulos mediante microscopía electrónica , se utilizan metales pesados como plomo , uranio o tungsteno . Las regiones a colorear se oscurecen porque pocos electrones logran atravesar estos metales.