Un medio de cultivo es un soporte que permite el cultivo de células , bacterias , levaduras y mohos para permitir su estudio. En principio, las células encuentran en este medio los componentes esenciales para su multiplicación en gran número, rápidamente, pero también en ocasiones elementos que permitirán privilegiar un género bacteriano o una familia. Así, dependiendo de la finalidad del cultivo, es posible colocar los microorganismos en condiciones óptimas, o totalmente desfavorables.
Consta de una base ( agar-agar , agua, minerales , etc. ) así como de un indicador coloreado de pH o reacción redox para permitir formular hipótesis sobre el género.
También existen caldos de cultivo que tienen la misma función, pero estos medios no contienen agar-agar, por lo que son completamente líquidos.
Este artículo detalla las características de los medios de cultivo relacionados con la microbiología .
Un medio mínimo o medio definido es un medio que comprende los elementos químicos estrictamente necesarios para el crecimiento bacteriano , en una forma que puede ser utilizada por bacterias que no tienen requisitos particulares.
Composición de un medio mínimo:
En ausencia de uno de estos componentes, las bacterias no crecen porque no pueden sintetizar estos productos. Es la adición de factores de crecimiento apropiados lo que permite que las bacterias fastidiosas prosperen.
Un medio de cultivo denominado " empírico " es un medio que contiene productos de origen natural y cuya composición exacta se desconoce.
En el medio tipo corazón-cerebro hay agua, agar-agar, hidrolizado de corazón y cerebro sin conocer los aspectos cualitativos y cuantitativos. Por lo tanto, se utilizará solo para el crecimiento de bacterias. No tiene efecto selectivo.
La primera investigación sobre virus , de la década de 1930, utilizó el huevo de gallina embrionado como medio de cultivo. El agente a multiplicar se inocula en las membranas amnióticas o alantoideas . En este sistema fue posible estudiar los virus de viruela , herpes , influenza , paperas , rabia , etc. , así como bacterias intracelulares como rickettsiae . En la década de 1950 , este sistema fue reemplazado con mayor frecuencia en los laboratorios de investigación por el cultivo celular . Todavía se usa para la producción de la vacuna contra la influenza .
Los medios de cultivo denominados " selectivos " solo permiten el cultivo de ciertos tipos de microorganismos. A esto le sumamos elementos que inhiben el crecimiento de microorganismos no deseados como el cloruro de sodio en alta concentración, tiosulfato de sodio , violeta cristal o ciertos antibióticos .
Los elementos añadidos se seleccionan de acuerdo con las características del microorganismo buscado. Estos medios se utilizan para el análisis de una muestra polibacteriana. Este medio permite seleccionar solo en caso de cribado positivo: resistencia a un antibiótico , prototrofia , etc.
Ejemplos de medios selectivos:
Los medios de cultivo enriquecidos contienen, además de los componentes básicos, componentes esenciales para las bacterias, que estas últimas no pueden sintetizar. Se trata de medios utilizados para obtener las llamadas bacterias " exigentes " y auxotróficas. Por ejemplo: medio de sangre fresca (la sangre es rica en diversos nutrientes como el hierro, principal factor de crecimiento de las bacterias): agar sangre fresca o cocida. Los medios con suero, yema de huevo: agar Baird Parker o llamado “BP”.
El medio de cultivo denominado " diferencial " o " indicador " permite distinguir dos tipos de microorganismos que se desarrollan en un mismo medio. Este tipo de medio resalta ciertas características bioquímicas de los microorganismos (principalmente la capacidad de degradar un sustrato) en presencia de indicador (es) de la reacción química: indicadores coloreados de pH o redox (como rojo neutro , rojo fenol , eosina o metileno). azul ).
Entre los medios diferenciales encontramos:
Este medio puede ser selectivo o no. Su principio se basa en la presencia de uno o más sustratos acoplados a una molécula cromogénica. Cuando este sustrato es metabolizado por una enzima bacteriana específica, el cromógeno asociado adquiere un color particular (se convierte en un cromóforo) directamente legible en la colonia. Si la enzima existe solo en una especie bacteriana determinada, la identificación es inmediata.
Entre estos entornos, encontramos:
Cultivo de Escherichia coli en CPS E de orina.
Cultivo de Enterococcus faecalis en CPS E de orina.
Cultivo de KESC en CPS E de orina.
Cultivo de Proteus en CPS E de orina.
Desde 2014, la norma ISO 1133 impone controles sobre el desempeño de los entornos. Esto debe hacerse en frecuencias regulares como: